植物可溶性蛋白(sprotein)ELISA試劑盒用于檢測血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液等樣本中植物可溶性蛋白(sprotein)的濃度。劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中指標(biāo)表達。用純化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，可與樣品中指標(biāo)相結(jié)合，經(jīng)過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）與待測樣品中植物可溶性蛋白(sprotein)濃度呈正相關(guān)。擬合校準(zhǔn)品曲線，可以計算出樣本中植物可溶性蛋白(sprotein)的濃度。
操作步驟：
實驗前準(zhǔn)備：
試劑盒從冷藏環(huán)境取出后，室溫平衡30分鐘，所有試劑使用前充分搖勻，避免局部濃度不均。
提前設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣本孔，做好標(biāo)記，避免后續(xù)加樣混淆。
提前配置好洗滌液，按說明書比例用超純水稀釋，備用。
加樣孵育：
標(biāo)準(zhǔn)品孔加入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL，待測樣本孔加入預(yù)處理好的樣本10μL，再加入樣本稀釋液40μL。
每孔加入100μL酶標(biāo)試劑，空白孔不加，封板膜密封后37℃恒溫孵育60分鐘。
洗滌顯色：
小心揭掉封板膜，棄去液體后甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，重復(fù)5次，拍干孔內(nèi)殘留液體。
每孔先后加入顯色劑A、B各50μL，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。
終止讀數(shù)：
每孔加入50μL終止液，此時藍色液體立即轉(zhuǎn)為黃色。
以空白孔調(diào)零，15分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm波長處依次測定各孔的吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣本中植物可溶性蛋白的實際含量。
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更新時間：2026-08-12
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